WWW.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 21 |

«Российская академия сельскохозяйственных наук Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук ...»

-- [ Страница 5 ] --

Обсуждаются достоинства и недостатки некоторых перспективных методов, таких как денату рирующий градиентный гель-электрофорез (DGGE), температурный градиентный гель-элек трофорез (TGGE), анализ одноцепочечного конформационного полиморфизма (SSCP), анализ полиморфизма длин терминальных рестрикционных фрагментов (T-RFLP), рестрикционный анализ амплифицированной рибосомальной ДНК (ARDRA), автоматический анализ межген ных спейсеров (ARISA), секвенирование и пр.

Ключевые слова: микобиота, диагностика, идентификация, секвенирование, сообщества грибов.

Несмотря на большое практическое и фунда- К другим молекулярным методам, позволяю ментальное значение, сведения о видовом разноо- щим изучать сообщества грибов, относят анализ бразии и функциональной роли грибов в различных профилей жирных кислот фосфолипидов (PFLA), сообществах до последнего времени накапливались флуоресцентную in situ гибридизацию (FISH), ме сравнительно медленно. При использовании клас- тод меченых атомов (SIP), микроавторадиогра сических методов идентификации, подразумеваю- фию (MAR), рамановскую микроспектроскопию, щих определение грибов по культурально-морфо- наноструктурную вторично-ионную масс-спек логическим признакам, не образующие плодовых трометрию (NanoSIMS). Существующие методы тел, требовательные к субстрату, или некультивиру- пользуются неодинаковой популярностью. Осо емые виды могут остаться незамеченными исследо- бое место в этом списке занимают технологии вателем. С развитием современных молекулярных секвенирования нового поколения (NGS, NNGS).

методов появилась возможность подробно изучить В настоящее время молекулярные методы, ос всех членов сообществ, населяющих почву, воздух, нованные на технологии ПЦР, являются наиболее водоемы, донные отложения и разлагающиеся ор- мощным инструментом для оценки биологиче Большинство молекулярных методов осно- Однако использование ПЦР поднимает и ряд вываются на технологии полимеразно-цепной проблем. Одной из них является формирование реакции (ПЦР), т. е. на предварительной ампли- рекомбинатных последовательностей, или хи фикации интересующего таксономически значи- мер, в процессе амплификации. В присутствии мого участка геномной ДНК. Такие методы можно минимум двух схожих матриц, преждевременно разделить на фингерпринтинг и секвенирование. терминированные, и поэтому незавершенные ам Фингерпринтинг, или ДНК-профилирование — пликоны, в следующем цикле гибридизируются получение профиля ДНК изучаемого сообщества с неидентичными матрицами и достраиваются электрофоретическим разделением ампликонов комплементарно исходному коду этих матриц.

с разной молекулярной массой. К фингерприн- Число получившихся таким образом молекул бу тингу относят денатурирующий градиентный дет удваиваться каждый новый цикл. Проблема гель-электрофорез (DGGE), температурный гра- образования химер пристально изучалась, т. к. их диентный гель-электрофорез (TGGE), анализ присутствие может приводить к переоценке био одноцепочечного конформационного полимор- разнообразия изучаемого сообщества и к появле физма (SSCP), анализ полиморфизма длин терми- нию новых ошибочных таксонов. Чаще всего к их нальных рестрикционных фрагментов (T-RFLP), появлению могут приводить чрезмерно длинные рестрикционный анализ амплифицированной участки, выбранные для амплификации, тип по рибосомальной ДНК (ARDRA), автоматический лимеразы, а также неэффективная программа анализ межгенных спейсеров (ARISA), биочипы. ПЦР (Jumpponen, 2007;

Lahr, Katz, 2009). Прото Секвенирование — выявление индивидуальной кол амплификации должен быть скорректирован последовательности нуклеотидов отдельного чле- таким образом, чтобы окончиться до того как ре на сообщества. Чтобы секвенировать фрагменты, акция войдет в фазу плато из-за дефицита компо представляющие собой смесь ампликонов тоталь- нентов, в противном случае возрастет количество ной ДНК сообщества, их необходимо предвари- недостроенных цепей, которые могут привести к тельно разделить с помощью методов ДНК-про- рекомбинации по описанному выше способу. Та филирования, ибо созданием библиотеки клонов. ким образом, выявление химер является важным 76 Раздел 2. Доклады сотрудников лаборатории микологии и фитопатологии им. А. А. Ячевского ВИЗР шагом в процессе получения и обработки экспе- ARDRA является расширением традицион риментальных данных. Для облегчения такой ной техники RFLP. Для амплификации обычно трудоемкой задачи существуют специальные про- используется участок рибосомального оперона, граммы, например, общедоступно приложение включающий часть гена 18S РНК, внутренний Chimera Check на сайте Ribosomal Database Project транскрибируемый спейсер 1 (ITS1), ген 5,8S РНК, и др. (Edgar et al., 2011). К проблемам технологии внутренний транскрибируемый спейсер 2 (ITS2), ПЦР можно отнести амплификацию случайных и часть гена 28S РНК. Полученный участок об таксонов, неспецифичных фрагментов, а также рабатывается мелкощепящими рестриктазами, склонность праймеров с широкой специфично- а продукты рестрикции подвергаются электро стью к преимущественной амплификации одной форезу в агарозном или полиакриламидном геле.

цели по сравнению с другой (Anderson et al., 2003). Можно получить профиль всего сообщества, под Кроме того, выбор методики экстракции, акти- вергнув рестрикции смесь ампликонов, но чаще ваторов ПЦР и присутствие ингибиторов влияет создают библиотеку клонов, которые затем по от на воспроизводимость и результативность ПЦР дельности подвергаются ARDRA. Это позволяет (Hernandez-Soriano et al., 2012). выявить клоны с уникальными рестрикционны DGGE/TGGE — два популярных метода для ми профилями, определить биоразнообразие из оценки биоразнообразия исследуемых экосистем. учаемого сообщества и при необходимости секве Методы основываются на электрофорезе ампли- нировать полученные клоны, избежав при этом фицированных участков рибосомальной ДНК многократных повторов.

в полиакриламидном геле c градиентом концен- С ростом популярности и доступности тех трации денатурирующего агента (DGGE) или тем- нологии автоматического капиллярного электро пературным градиентом (TGGE). Амплификация фореза широкое распространение получил метод фрагментов проводиться с использованием пары T-RFLP. Его главным преимуществом является праймеров, один из которых модифицирован производительность и более высокая разреша специальной последовательностью, содержащей ющая способность в сравнении с технологиями, монотонные GC повторы (GC-скрепка). После основанными на электрофорезе в полиакрила ПЦР с таким праймером один из концов ампли- мидном геле. T-RFLP, как и ARDRA, является кона приобретает повышенную тугоплавкость. расширением традиционной технологии RFLP, При электрофорезе под действием денатурирую- но позволяет проводить анализ только по од щего агента ампликоны, представленные двухце- ному терминальному фрагменту. Это снижает почечными фрагментами ДНК, начинают разру- сложность профиля, но не уменьшает многооб шаться до одноцепочечных, однако их полному разия идентифицируемого сообщества. Суще расхождению препятствует наличие GC-скрепки. ствуют компьютерные программы (например, В результате частично денатурировавшие фраг- Phylogenetic Assignment Tool), позволяющие ис менты приобретают сложную пространственную следователю получить сведения о предполагае конфигурацию и мигрируют с индивидуальной мой таксономической принадлежности членов скоростью, которая напрямую зависит от длины грибного сообщества, основываясь на данных ре и соотношения оснований в нуклеотидных после- стрикции. Однако такой подход может привести В методе SSCP предварительно денатури- ные виды рода Cortinarius могут иметь одинако рованные до одноцепочечных фрагментов ам пликоны, получившиеся в результате ПЦР а штаммы одного вида Pisolithus формируют раз тотальной ДНК, подвергаются разделению в по- ные RFLP-профили (Hitchcock et al., 2003).

лиакриламидном геле. В отличие от DGGE/TGGE При использовании ARISA определяются эта методика не требует использования прайме- длины фрагментов ДНК, полученных амплифи ров с GC-скрепкой или дополнительного обо- кацией участка гена рРНК грибов, содержащего рудования. Проблемой использования данного внутренние транскрибируемые спейсеры (ITS), метода является высокая вероятность повторной с флуоресцентным праймером (Ranjard et al., 2001).

гибридизации денатурированных одноцепочеч- Метод ARISA похож на T-RFLP и ARDRA, но в от ных фрагментов во время электрофореза. Но она личие от последних амликоны не подвергаются может быть преодолена: при амплификации один рестрикции. ITS отличаются высоким межвидо из праймеров должен быть фосфорилированным;

вым полиморфизмом и исследователи допускают, в этом случае последовательность, образованная что их длина уникальна для каждого отдельного с его участием, деградируется экзонуклеазой фага вида, но так бывает не всегда. Поэтому, для того, а противоположная цепочка, не нашедшая себе чтобы свести вероятность ошибки в идентифи комплементарной пары, используется для элек- кации к минимуму, необходимо предварительно трофореза (Schwieger, Tebbe, 1998). собрать информацию о возможном составе изу Казарцев И. А. Молекулярные методы исследования грибных сообществ.

чаемого сообщества, используя другие доступные ляют получать сопоставимые данные за мень методы, в том числе идентификацию по культу- шие промежутки времени. Например, в образцах рально-морфологическим признакам (Torzilli et почвы, собранных в учебно-опытных лесах при al., 2006;

Slemmons et al., 2013). T-RFLP и ARISA не Университете Дьюка (Северная Каролина, США), поддерживают возможность выделения амплико- за короткий срок удалось выявить 412 опера нов из полученного профиля сообщества, однако ционных таксономических единиц (ОТЕ), при обладают рядом других преимуществ. Использо- надлежащих грибам (O’Brien et al., 2005). При вание автоматических секвенаторов увеличивает изучении жизнедеятельности микроорганизмов потенциальную производительность этих мето- альпийской тундры в течение зимнего периода дов, и обеспечивает высокую чувствительность в штате Колорадо (США) исследователи опреде за счет использования внутренних стандартов, лили 125 ОТЕ, при этом несколько крупных так современных средств детекции флуоресцентного сонов (подтип, класс) ранее неизвестных науке сигнала, полимеров с высоким разрешением и на- грибов (Schadt et al., 2003). Изучая разнообразие личия специального программного обеспечения грибных спор, представленных в аэротопе нару С помощью вышеприведенных методов уда- Норвегии, удалось обнаружить 84 ОТЕ (Kauserud лось изучить влияние нефтепродуктов (van Elsas et al., 2005). Анализ образцов почвы из дождевого et al., 2000), азота (Lowell, Klein, 2001), углекисло- леса (Куско, Перу), степи (Канзас, США) и пусты го газа (Klamer et al., 2002), фумигации (Hoshino, ни (Калифорния, США) выявил, соответственно, Matsumoto, 2007) и профилактического выжига- 216, 235 и 207 ОТЕ, принадлежащих грибам (Fierer ния (Chen, Cairney, 2002) на структуру грибного et al., 2007). Со временем выяснилось, что количе сообщества в различных экосистемах;

установить ство новых таксономических единиц в анализиру видовой состав грибов, обитающих в торфе (Artz емом образце может возрастать пропорциональ et al., 2007), подтвердить высокое видовое разноо- но количеству обрабатываемых нуклеотидных бразие грибов в ризосфере, в сравнении с приле- последовательностей и ограничивается только гающей почвой (Gomes et al., 2003). производительностью самой технологии секвени Исследовательские приемы, основанные на рования. Предполагаемое таксономическое разно технологии секвенирования по Сэнгеру, позво- образие почвенных грибов на площади в 100 м, ляют подробно изучить структуру сообщества, рассчитанное на основании моделей, может быть функциональную и филогенетическую взаимос- беспрецедентным по своим масштабам и дости вязь между отдельными его членами. Получив гать свыше 104 видов (Fierer et al., 2007).

нуклеотидную последовательность можно уста- Появление технологий секвенирования но новить ее сходство с другими референсными по- вого поколения (NGS, NNGS) в корне изменило следовательностями, представленными в регуляр- представление о возможном масштабе исследова но обновляемой базе данных (GenBank), которая тельских задач. NGS позволяет осуществлять про доступна всем пользователям на сервере NCBI. чтение сотен миллионов нуклеотидов за один ра Технологии ДНК-профилирования и создания бочий цикл, это открывает широкие возможности библиотек клонов в комбинации с секвенирова- для использования данного метода в изучении нием длительное время исправно обеспечивали природных сообществ микроорганизмов (Su et al., исследователей экспериментальными данными, 2012). В 2008 году технология NGS была впервые способствуя более глубокому пониманию струк- опробована для изучения почвенных грибов в об туры, богатства и значения грибного сообще- разцах, отобранных в разных районах Франции ства. Описанные подходы, наконец, позволили (Bue et al., 2009). В результате, было получено подтвердить, что биоразнообразие исследуемых 166350 нуклеотидных последовательностей ITS природных образцов гораздо больше, чем можно и выявлено до 1000 ОТЕ. При этом количество установить классическими методами (Borneman, ОТЕ, представленных всего лишь одной после Hartin, 2000). Так швейцарским ученым, исполь- довательностью, достигало 60% от всего опреде зующим классические методы идентификации, ленного таксономического многообразия. Эти понадобился 21 год, чтобы найти и определить данные свидетельствуют о том, что большинство 408 видов грибов на специально оборудованных видов почвенных грибов развиваются строго ком пробных площадях. При этом количество еже- партментально или находятся в покоящейся фазе.

годно определяемых видов менялось от 18 до 194, Таким образом, современные данные позволяют и только 8 видов находили постоянно (Straatsma получить представление о богатстве окружающе et al., 2001). Молекулярные методы не зависят от го мира и по-иному взглянуть на процессы, про пространственно-временных факторов и позво- исходящие в природных экосистемах.

78 Раздел 2. Доклады сотрудников лаборатории микологии и фитопатологии им. А. А. Ячевского ВИЗР Литература Anderson I. C., Campbell C. D., Prosser J. I. Potential bias of fungal 18S rDNA and internal transcribed polymerase chain reaction primers for estimating fungal biodiversity in soil // Environ. Microbiol., 2003, 5, 1, p. 36–47.

Artz R. R., Anderson I. E., Chapman S. J., Hagn A., Schloter M., Potts J. M., Campbell C. D. Changes in fungal community composition in response to vegetational succession during the natural regeneration of cutover peatlands // Microbial Ecology, 2007, 54, 3, p. 508–522.

Bue M., Reich M., Murat C., Morin E., Nilsson R. H., Uroz S., Martin F. 454 Pyrosequencing analyses of forest soils reveal an unexpectedly high fungal diversity // New Phytol., 2009, 184, 2, p. 449–456.

Borneman J., Hartin R. J. PCR primers that amplify fungal rRNA genes from environmental samples // Appl. Environ.

Microbiol., 2000, 66, 10, p. 4356–4360.

Chen D. M., Cairney J. W. G. Investigation of the influence of prescribed burning on ITS profiles of ectomycorrhizal and other soil fungi at three Australian sclerophyll forest sites // Mycol Res, 2002, 106, 5, p. 532–540.

Edgar R. C., Haas B. J., Clemente J. C., Quince C., Knight R. UCHIME improves sensitivity and speed of chimera detection // Bioinformatics, 2011, 27, 16, p. 2194–2200.

Fierer N., Breitbart M., Nulton J., Salamon P., Lozupone C., Jones R., Robeson M., Edwards R. A., Felts B., Rayhawk S. et al. Metagenomic and small-subunit rRNA analyses reveal the genetic diversity of bacteria, archaea, fungi, and viruses in soil // Appl. Environ. Microbiol., 2007, 73, 21, p. 7059–7066.

Gomes N. C., Fagbola O., Costa R., Rumjanek N. G., Buchner A., Mendona-Hagler L., Smalla K. 2003. Dynamics of fungal communities in bulk and maize rhizosphere soil in the tropics // Appl. Environ. Microbiol., 2003, 69, 7, р. 3758–3766.

Hoshino Y. T., Matsumoto N. Changes in fungal community structure in bulk soil and spinach rhizosphere soil after chemical fumigation as revealed by 18S rDNA PCR-DGGE // Soil Science and Plant Nutrition, 2007, 53, 1, p. 40–55.

Hernandez-Soriano M. C. et al. Molecular Soil Health and Land Use Management, 2012, Rijeka, InTech, 332 p.

Hitchcock C. J., Chambers S. M., Anderson I. C., Cairney J. W. G. Development of markers for simple sequence repeat rich regions that discriminate between Pisolithus albus and P. microcarpus // Mycol. Res., 2003, 107, 6, p. 699–706.

Jumpponen A. Soil fungal communities underneath willow canopies on a primary successional glacier forefront: rDNA sequence results can be affected by primer selection and chimeric data // Microbial Ecology, 2007, 53, 2, p. 233–246.

Krn O., Hgberg N., Dahlberg A., Jonsson L., Nylund J. E. (1997) Inter- and intraspecific variation in the ITS region of rDNA of ectomycorrhizal fungi in Fennoscandia as detected by endonuclease analysis // New Phytol., 1997, 136, 2, p. 313–325.

Kauserud H., Lie M., Stensrud O., Ohlson M. Molecular characterization of airborne fungal spores in boreal forests of contrasting human disturbance // Mycologia, 2005, 97, 6, p. 1215–1224.

Klamer M., Roberts M. S., Levine L. H., Drake B. G., Garland J. L. Influence of elevated CO2 on the fungal community in a coastal scrub oak forest soil investigated with terminal restriction fragment length polymorphism analysis // Appl.

Environ. Microbiol., 2002, 68, 9, p. 4370–4376.

Lahr D. J., Katz L. A. Reducing the impact of PCR-mediated recombination in molecular evolution and environmental studies using a new-generation high-fidelity DNA polymerase // Biotechniques, 2009, 47, 4, p. 857–866.

Lowell J. L., Klein D. A. Comparative single stranded conformation polymorphism (SSCP) and microscopy-based analysis of nitrogen cultivation interactive effects on the fungal community of a semiarid steppe soil // FEMS Microbiol.

Ecol., 2001, 36, 2, p. 85–92.

O’Brien H. E., Parrent J. L., Jackson J. A., Moncalvo J. M., Vilgalys R. Fungal community analysis by large-scale sequencing of environmental samples. Appl. Environ. Microbiol., 2005, 71, 9, p. 5544–5550.

Ranjard L. et al. Characterization of bacterial and fungal soil communities by automated ribosomal intergenic spacer analysis fingerprints: biological and methodological variability // Appl. Environ. Microbiol., 2001, 67, 10, p. 4479–4487.

Schadt C. W., Martin A. P., Lipson D. A., Schmidt S. K. Seasonal dynamics of previously unknown fungal lineages in tundra soils // Science, 2003, 301, p. 1359–1361.

Schwieger F., Tebbe С. С. A New Approach To Utilize PCR–Single-Strand-Conformation Polymorphism for 16S rRNA Gene-Based Microbial Community Analysis // Appl. Environ. Microbiol., 1998, 64, 12, p. 4870–4876.

Slemmons C., Johnson G., Connel L. B. Application of an automated ribosomal intergenic spacer analysis database for identification of cultured Antarctic fungi // Antarctic Science, 2013, 25, 1, p. 44–50.

Straatsma, G., F. Ayer, and S. Egli. Species richness, abundance, and phenology of fungal fruit bodies over 21 years in a Swiss forest plot. Mycol. Res., 2001, 105, 5, p. 515–523.

Su C., Lei L., Duan Y., Zhang K. Q., Yang J. Culture-independent methods for studying environmental microorganisms:

methods, application, and perspective // Appl. Microbiol. Biotechnol., 2012, 93, 3, p. 993–1003.

Torzilli A. P., Sikaroodi M., Chalkley D., Gillevet P. M. A comparison of fungal communities from four salt marsh plants using automated ribosomal intergenic spacer analysis (ARISA) // Mycologia, 2006, 98, 5, p. 690–698.

van Elsas J. D., Duarte G. F., Keijzer-Wolters A., Smit E. Analysis of the dynamics of fungal communities in soil via fungal-specific PCR of soil DNA followed bydenaturing gradient gel electrophoresis // J. Microbiol. Methods, 2000, 43, 2, p. 133–151.

Левитин М. М. А. А. Ячевский и проблемы видообразования.

MOLECULAR TECHNIQUES FOR FUNGAL

COMMUNITY IDENTIFICATION

The review is devoted to the methods, allowing to study of fungi communities and other microorganisms. It was discussed the advantages and disadvantages of such methods as denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE), temperature gradient gel electrophoresis (TGGE), (single-strand conformation polymorphism analysis (SSCP), Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism (T-RFLP), the amplified rDNA restriction analysis (ARDRA) Automated Ribosomal Intergenic Spacer Analysis (ARISA), a sequencing and etc.

Kew words: mycobiota, fungal community, diagnostics, identification, sequence analysis.

А. А. ЯЧЕВСКИЙ И ПРОБЛЕМЫ ВИДООБРАЗОВАНИЯ

Россельхозакадемии (ВИЗР), Санкт-Петербург — Пушкин, Россия, mark_levitin@rambler.ru Рассматривается развитие представлений о видообразовании у грибов. Обсуждается роль мута ционного и рекомбиногенного процессов, мобильных генетических элементов и эпигенетиче ских механизмов в видообразовании грибов, а также дивергенция популяций при расхождении фитопатогенных грибов по трофическим нишам и органотропной специализации.

Ключевые слова: видообразование, мутации, гибридизация, трофическая и органотропная специ ализации.

В 1927 г. была опубликована работа А. А. Ячев- дообразования стала рассматриваться с учетом ского «К вопросу о видообразовании у грибов». последних достижений биологической науки. Но Вопрос о видообразовании у грибов, пишет она, по-прежнему, осталась сложной для грибов.

А. А. Ячевский, «является в высшей степени слож- Обусловлено это разнообразием жизненных ци ным» (с. 1). Если в XYIII веке существовало поня- клов, различиями в ядерном статусе, миграцион тие о константности вида, то в ХIХ веке оно сме- ными возможностями, наличием полового или нилось представлениями об изменчивости вида бесполого размножения. Видимо, механизмы ви и о возможности происхождения новых видов от дообразования будут различны для телеоморф старых. Действительно, видообразование — про- ных и агамных видов грибов.

цесс, приводящий к расщеплению одного вида на У видов, размножающихся половым путем, два или более (Айала, Кайгер, 1988). в основе видообразования будут лежать комби А. А. Ячевский различает три пути новообра- нативные процессы и репродуктивная изоляция.

зования видов: постепенная медленная эволюция, Популяции телеоморфных грибов генотипиче мутации (эволюция скачками) и гибридизация. ски будут более разнообразны, чем клональные «Мутационный способ более широко распростра- популяции. Рекомбинация продуцирует новые нен у грибов», отмечает А. А. Ячевский (с. 36). Он генотипы, среди которых могут быть более при приводит многочисленные примеры мутаций способленные к условиям среды. Кроме того, у грибов. Считает важной субстратную мутацию рекомбинация это путь очистки популяции от (с. 44). Она определяет взаимоотношения па- вредных мутаций, которые аккумулируются в по разита и питающего растения. Также подробно пуляциях асексуальных клонов (Giraud et al., 2008).

А. А. Ячевский останавливается на роли гибриди- У агамных видов грибов видообразование бу зации в видообразовании грибов. дет значительно отличаться от грибов с половым Более 80-ти лет прошло с выхода в свет этой процессом. Во-первых, у агамных видов практиче работы А. А. Ячевского. За эти годы сделаны ски отсутствует рекомбинация, несмотря на воз крупнейшие открытия в биологии, разработаны можность прохождения парасексуального процес уникальные методы исследований. Проблема ви- са, приводящего к митотической рекомбинации.

80 Раздел 2. Доклады сотрудников лаборатории микологии и фитопатологии им. А. А. Ячевского ВИЗР Видообразование будет в первую очередь связано расхождением по трофическим нишам (Дьяков, с мутационными процессами, и любая новая мута- 2008). Недавно было опубликовано сообщение ция, особенно, если ей будут благоприятствовать о появлении на пшенице гриба Pyrenophora teres экологические условия, может дать начало новой Drechsler (Михайлова и др., 2010). Этот вид из разновидности или новому виду. При огромной вестен как возбудитель сетчатой пятнистости численности клеток грибной популяции всегда ячменя. Были изучены морфологические и ге можно ожидать появление спонтанной мутации, нетические особенности изолятов, поражающие благоприятной для естественного отбора. разные растения-хозяева. Показано, что «ячмен Разнообразие генетических механизмов ные» изоляты имеют достоверно более короткие обеспечивает эволюцию грибных популяций конидии, чем «пшеничные», и меньшее число и быстрый процесс видообразования. Кроме ре- клеток Достоверные различия между конидиями комбиногенного и мутационного механизмов «ячменных» и «пшеничных» изолятов, имеющих на процесс видообразования будут оказывать общее географическое происхождение, свиде влияние вирусы грибов и мобильные генетиче- тельствуют, по мнению авторов, о генетической ские элементы (транспозоны), находящиеся в ге- дифференциации изолятов, связанной с парази номах многих грибов и приводящие к крупным тированием на различных видах растений (Ми геномным перестройкам (Шнырева, 2003), а так- роненко и др., 2012).

же, эпигенетические механизмы, способствую- Известно, что гриб Cochliobolus sativus щие изоляции грибных популяций. Популяции (S. Ito & Kurib.) Drechsler ex Dastur поражает яч должны генетически дифференцироваться, тогда мень и пшеницу. Изучение популяций гриба, между ними будут более интенсивно накапли- изолированных с ячменя и пшеницы, показало ваться генетические различия. Этот процесс осо- (Mironenko, Bulat, 2001), что «ячменные» изоляты бенно успешно развивается в генетически разоб- обладали большей изменчивостью по структуре щенных популяциях. Примером может служить генома, чем «пшеничные». В популяции домини вид Fusarium graminearum Schwabe (Гагкаева, ровал один хозяино-специфичный гаплотип. Вы 2011). Мультилокусный молекулярный анализ сказано предположение, что полиморфизм попу штаммов этого патогена, различного географи- ляции C. sativus обусловлен дивергенцией вида на ческого происхождения, выявил филогенетиче- молекулярном уровне. Возможно, на пшенице по ски различающиеся линии, группирующиеся явилась разновидность этого вида или возник но в кластеры в соответствии с их географическим вый вид, приуроченный к поражению пшеницы.

происхождением: южно-американский, цен- Оценив специализацию гриба к различным видам трально-американский, азиатский, европейский. злаков (Мироненко, Сердюк, 2005), авторы иссле В настоящее время 15 филогенетических линий дований выдвинули гипотезу о физиологической получили ранг видов, вместе составляющих ком- специализации возбудителя на ячмене и пшенице.

плекс видов «F. graminearum species complex»: «Ячменные» изоляты были более агрессивны к яч F. austroamericanum T. Aoki, Kistler, Geiser et меню, «пшеничные» к пшенице. Различия между O'Donnell, F. meridionale T. Aoki, Kistler, Geiser et популяциями, изолированными с разных расте O'Donnell, F. boothii O'Donnell, T. Aoki, Kistler et ний-хозяев, коррелировали и по молекулярным Geiser, F. mesoamericanum T. Aoki, Kistler, Geiser маркерам.

et O'Donnell, F. acaciae-mearnsii O'Donnell, T. Aoki, Другой пример с видом Alternaria solani Kistler et Geiser, F. asiaticum O'Donnell, T. Aoki, Sorauer, доминирующим на картофеле. При диф Kistler et Geiser, F. graminearum sensu stricto, ференциации изолятов комплекса A. solani по мо F. cortaderiae O'Donnell, T. Aoki, Kistler et Geiser, лекулярным маркерам выделились два кластера:

F. brasilicum T. Aoki, Kistler, Geiser et O'Donnell, один состоял из изолятов, выделенных с карто F. vorosii B. Tth, Varga, Starkey, O'Donnell, H. Suga феля, другой — из изолятов, выделенных с тома et T. Aoki, F. gerlachii T. Aoki, Starkey, L. R. Gale, та (Орина, 2011). Можно предположить, что при Kistler et O'Donnell F. ussurianum T. Aoki, Gagkaeva, выращивании картофеля поблизости от томатов Yli-Mattila, Kistler et O'Donnell, F. aethiopicum происходила постепенная дивергенция вида на O'Donnell, Aberra, Kistler et T. Aoki, F. nepalense специализированные формы, которые эволюци T. Aoki, Carter, Nicholson, Kistler et O’Donnell, онировали в самостоятельные виды. В результате F. louisianense Gale, Kistler, O’Donnell et T. Aoki. возник вид Alternaria tomatophila E. G. Simmons, Несмотря на большую значимость аллопа- паразитирующий на томате. Аналогичная ситуа трического видообразования, возможна дивер- ция описана с возбудителем фитофтороза карто генция и видообразование у грибов без геогра- феля (Дьяков и др., 1994). Эпифитотии фитофто фической изоляции в пределах исходного ареала роза картофеля, которые наблюдались в Европе вида (Дьяков, Лекомцева, 1984). Видообразование после завоза картофеля и мексиканских штаммов у фитопатогенных грибов может быть вызвано возбудителя, были вызваны «картофельными»

Левитин М. М. А. А. Ячевский и проблемы видообразования.

изолятами. На томатах эпифитотии не наблюда- спектрам ферментов и агрессивности. Показате лось. Дивергентная эволюция вида Phytophthora ли сходства морфофенов и электрофоретических infestans привела к специализации штаммов воз- спектров ферментов в популяциях с колосковых На процесс видообразования может ока- с колосковых чешуй значительно превосходила зывать влияние и органотропная специализа- по агрессивности популяцию, изолированную ция гриба. Гриб C. sativus вызывает корневую с корневой системы. Можно предположить, что гниль и темно-бурую пятнистость листьев яч- органотропная специализация привела к изоля меня и пшеницы. Анализ генетической структу- ции субпопуляций паразита.

ры популяций C. sativus, выделенных с листьев Проблема видообразования у грибов пред и корневой системы ячменя и корневой системы ставляет интерес не только для микологов, писал пшеницы показал различия в дифференциации А. А. Ячевский, «но и вообще для всех биологов, соответственно хозяину и тканям растения (ли- причем необходимо подчеркнуть, что именно стья, корни) из которых изоляты были выделены грибы являются во многих отношениях, такие как (Gyawali et al., 2012). Нами была проанализиро- борьба с болезнями, карантин и свободная торгов вана структура популяций гриба F. graminearum, ля и сохранение экосистем и грибковых разновид формирующихся на корневой системе и колосе ностей зависят от нашего понимания не только озимой пшеницы (Левитин, Гагкаева, 1991). Срав- диагноза разновидностей, но также и того, как нивали морфолого-культуральные признаки, раз- разновидности оказываются».

нообразие популяций по электрофоретическим Литература Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика, 1988, 3, 335 с.

Гагкаева Т. Ю. Классификация грибов рода Fusarium — дискуссия длиною в двести лет / Микология сегодня.

Ю. Т. Дьяков, Сергеев Ф. Ю. (ред.), том 2, М.: Национальная академии микологии, 2011, с. 14–29.

Дьяков Ю. Т. Грибы: индивидуумы, популяции, видообразование // Журнал общей биологии, 2008, 69, 1, с. 10–18.

Дьяков Ю. Т., Долгова А. В., Рыбакова И. Н., Багирова С. Ф. Дивергенция популяции фитопатогенного гриба Phytophthora infestans (Mont.) de Bary в связи со специализацией к растениям-хозяевам // Журнал общей био логии, 1994, 55, 2, с. 171–188.

Дьяков Ю. Т., Лекомцева С. Н. О симпатрическом видообразовании у грибов // Биологические науки, 1984, 11, с. 5–16.

Левитин М. М., Гагкаева Т. Ю. Сравнительный анализ популяций Fusarium graminearum Schwabe, выделен ных с разных органов озимой пшеницы. Микол. и фитопатол., 1991, 25, 1, с. 73–79.

Михайлова Л. А., Тернюк И. Г., Мироненко Н. В. Pyrenophora teres — возбудитель пятнистости листьев пшеницы //Микол. и фитопатол., 2010, 44, 1, с. 63–68.

Мироненко Н. В., Коваленко Н. М., Михайлова Л. А. Морфологическая и генетическая характеристика изо лятов Pyrenophora teres f. teres, поражающих пшеницу// III всероссийская и международная конференция «Со временные проблемы иммунитета растений к вредным организмам», посвященная 125-летию со дня рожде ния Н. И. Вавилова, Санкт-Петербург, 2012, с. 149–152.

Мироненко Н. В., Сердюк А. А. Специализация возбудителя темно-бурой пятнистости гриба Cochliobolus sativus к различным видам злаков / Культурные растения для устойчивого сельского хозяйства в XXI веке (иммунитет, селекция, интродукция). М.: Россельхозакадемия, 2000, с. 183–210.

Орина А. С. Видовой состав возбудителей альтернариоза пасленовых культур на территории России // Автореф. канд. дисс. СПб, 2011, 19 с.

Ячевский А. А. К вопросу о видообразовании у грибов// Материалы по микологии и фитопатологии, 1927, 6, 1, с. 1–56.

Giraud Y., Refregier G., Le Gac M., de Vienne D. M., Hood M. E. Speciation in fungi // Fungal Genetics and Biology, 2008, 45, c. 791–802.

Gyawali S., Neate S. M., Adhikari T. B., Puri K. D., Burlakoti R. R., Zhong S. Genetic Structure of Cochliobolus sativus Populations Sampled from Roots and Leaves of Barley and Wheat in North Dakota// J Phytopathol., 2012, v.

160, p. 637–646.

Mironenko N. V. Bulat S. A. Genetic structure of Cochliobolus sativus (Bipolaris sorokiniana) populations isolated from different hosts as revealed by UP-PCR (RAPD-like) technique (2001) // J. of Russian Phytopathol. Soc., v. 2, part 1, p. 25–30.

82 Раздел 2. Доклады сотрудников лаборатории микологии и фитопатологии им. А. А. Ячевского ВИЗР

A. A. JACZEWSKI AND PROBLEMS OF SPECIES FORMATION

The evolution of concepts of speciation in fungi is described. The various genetic processes underlying speciation in fungi, role of biological features of fungi in the course of speciation are discussed, examples of experimental researches with different fungi are given.

Kew words: fungi, species formation, populations, mutation, hybridization, divergence.

ОСОБЕННОСТИ РАЗВИТИЯ В ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЕ

ГРИБА SCLEROTINIA SCLEROTIORUM,

ВЫДЕЛЕННОГО ИЗ КОНОПЛИ

Россельхозакадемии (ВИЗР), Санкт-Петербург — Пушкин, Россия, dandrep@mail.ru Подобрана оптимальная питательная среда для культивирования штамма гриба Sclerotinia sclerotiorum — соево-глюкозный агар. На этой среде у изучаемого штамма S. sclerotiorum обра зовывалось большое количество микроконидий и развивался вторичный мицелий.

Ключевые слова: Sclerotinia sclerotiorum, соево-глюкозная среда, микроконидии.

Гриб Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary, име- с этим патогеном, уделяется склероциям и апоте ющий широкое географическое распространение, циям.

отличается своей вредоносностью, вызывая зна- Исследования по изучению микроконидий чительные потери урожая. Особенно опасен этот весьма ограничены, их роль в жизненном цикле патоген для овощных и масличных культур (На- этого гриба до сих пор не ясна. В большинстве умов, 1952;

Adams et al., 1974;

Willets, Wong, 1980;

работ, посвященных белой гнили, микрокони Steadman, 1983;

Simmonds et al., 2001). дии упоминаются только «мимоходом» (цит. по Развитие гриба сопровождается характерны- Willets et Wong, 1980). Кроме того, некоторые ми внешними признаками, вследствие которых авторы указывают на отсутствие конидий у это заболевание, вызываемое этим грибом, носит на- го вида (Purdy, 1955;

Райтвийер, 1976;

Steadman, звание — белая гниль. При высокой влажности 1983;

Билай, 1988).

воздуха поверхность пораженного растения по- Вместе с тем, как отмечают Willets и Wong крывается относительно плотным, ватообразным, (1980), микроконидии часто видны в культуре белым, никогда не сереющим, воздушным мице- этого гриба и формируются из фиалид, возни лием, на котором появляются склероции. Внача- кающих на микроконидиофорах. Aytkhozhina ле они белые, а со временем становятся черными и Kolokolova (2001) также обращают внимание на (Наумов, 1952;

Willets, Wong, 1980). Характерной появление в старых культурах фиалид, продуци особенностью развития S. sclerotiorum в культуре рующих микроконидии. Английский исследова является определенный порядок в расположении тель Calong (1970) основное внимание посвятил склероциев: формируясь, они образуют концен- изучению ультраструктуры микроконидий и гиф трические круги на поверхности агаризованных мицелия. Автор описывает микроконидии, полу питательных сред;

созревание склероциев сопро- ченные им в 14 дневной культуре, выращенной вождается выделением экссудата на их поверхно- на картофельно-декстрозном агаре при 25°C, как сти, который исчезает у созревших склероциев овальные или грушевидные.

Гриб S. sclerotiorum образует септированный культуральные и морфологические особенности мицелий, склероции, микроконидии в анаморф- штамма №6 S. sclerotiorum, выделенного в чистую ной стадии и апотеции в телеоморфной стадии. культуру из гербарного образца конопли, собран Основное внимание исследователей, при работе ного в 2003 году в посевах Пензенского НИИСХ.

Шипилова Н. П., Дмитриев А. П.

Особенности развития в чистой культуре гриба Sclerotinia Sclerotiorum, выделенного из конопли.

По результатам предыдущих исследований гифы — в среднем 35,8±7,6 мкм. Размеры гиф пер (Шипилова, Дмитриев, 2011) наиболее благопри- вичного мицелия составили в среднем: широкие ятной для оптимального развития гриба оказалась гифы — 11,8±0,6 и их ответвления — 5,4±0,2 мкм.

богатая по составу агаризованная полусинтетиче- Через две недели после начала роста гриба ская соево-глюкозная среда (СГА) следующего со- конидиеносцы первичного мицелия начинают става: на 1 л воды (г) — KH2PO4 -2, (NH4)2SO4-1, усложняться, появляются фиалиды уже на под MgSO4-1, глюкоза-20, соевая мука-10. держивающей клетке, которая несет 1-3 фиалиды.

При инкубировании гриба S. sclerotiorum на Затем — разветвленные конидиеносцы и на картофельных средах с глюкозой (КГА) и сахаро- сутки — наблюдается начало массового образова зой (КСА), было отмечено появление микрокони- ния микроконидий.

дий, но только в старых культурах, в возрасте от В это же время в центре культуры, можно об 21 до 23 суток, и в незначительном количестве. На наружить тонкие гифы, средний диаметр кото СГА у изучаемого штамма гриба не только быстро рых 2,2±0,1 мкм, с одиночными фиалидами. Эти образовывалось большое количество микрокони- тонкие гифы, впоследствии, развиваются во вто дий на первичном мицелии, но также развивался ричный мицелий. При дальнейшем инкубирова и вторичный мицелий с массой микроконидий. нии чашек вторичный мицелий может появиться В условиях естественного освещения и темпе- с края колонии и на некоторых склероциях. Сле ратуре 19-210C при инокуляции СГА 5 мм блоком, дует отметить, что иногда вторичный мицелий вырезанным с 3-5 суточной материнской культу- может и не образовываться.

ры, в начале роста гриб формирует паутинистый Через несколько суток после появления вто мицелий. На 3 сутки мицелий полностью покры- ричного мицелия конидиеносцы, которые впо вает поверхность агаризованной среды и образует следствии усложняются, дихотомически ветвят обширную кольцевую зону густого, прижатого ся. На них образуется масса микроконидий, из-за белого мицелия, становящегося хлопьевидным. обилия которых мицелий может казаться поро Затем начинается образование мелких мицели- шистым.

альных сгустков, и появляются рыхлые белые бу- Микроконидии образуются из фиалид, кото горки — зачатки склероциев. Эти бугорки посте- рые имеют один конидиогенный локус (монофиа пенно увеличиваются в размерах, приобретают лиды). Фиалиды — ампуловидные, иногда искри форму склероциев и на них появляется экссудат вленные, расширенные в средней части, в старой (через сутки после появления бугорков). Склеро- культуре с четко выраженным воротничком, ции постепенно увеличиваются в размерах, начи- имеют следующие размеры: длина в среднем — нают сереть, а затем постепенно темнеют, стано- 9,4±0,4 (7,3–12,7) мкм, ширина (расширенной вясь черными. Через 5-7 суток экссудат начинает части) в среднем — 4,5±0,2 (3,3–6,9) мкм. Микро постепенно исчезать. При этом мицелий стано- конидии имеют округлую форму, иногда со слег вится более рыхлым, лучше отделяется от среды. ка вытянутым носиком, их размеры в среднем — Наблюдаются гифы мицелия (обычно более ши- 3,2±0,1 (2,8–3,6) мкм. Вначале микроконидии рокие) с частично разрушенными клеточными одиночные, при массовом развитии формируют На 11-12 сутки роста гриба (после исчезно- Нами выявлено, что в определенных услови вения экссудата практически на всех склероци- ях гриб способен к массовому продуцированию ях) начинают появляться одиночные фиалиды, микроконидий. Необходимы дальнейшие иссле причем клетки гиф, на которых формируются дования по выявлению биологического значения фиалиды намного короче, чем у обычной гифы. образуемых конидий в жизненном цикле этого Длина клетки, на которой формируется фиалида, опасного патогена.

в среднем — 9,1±0,7 мкм;

длина клетки обычной Литература Билай В. И. Микроорганизмы — возбудители болезней растений. Справочник. Киев. Наукова Думка, 1988, 549 с.

Наумов Н. А. Болезни сельскохозяйственных растений, М. -Л., 1952, 664 с.

Райтвийер А. Г. Порядок Гелоциевые (в группе порядков Дискомицеты). Жизнь растений, 1976, т. 2, 471 с.

Шипилова Н. П., Дмитриев А. П. Биологические особенности гриба Sclerotinia sclerotiorum, выделенного из конопли // Вестник защиты растений, 1, 2011, с. 20–26.

Adams P. B., Lumsden R. D. Tate C. J. Galinsoga parviflora: a new host for Whetzelinia sclerotiorum //Plant dis. reprt., 1974, 58, 8, p. 700–701.

Aytkhozhina N. A., Kolokolova N. K. Characteristics of Kazakhstani isolates of Sclerotinia sclerotiorum //Proc. of Sclerotinia 2001 — The XI Int. Sclerotinia Workshop, York 8th-12th July 2001, p. 21–22.

84 Раздел 2. Доклады сотрудников лаборатории микологии и фитопатологии им. А. А. Ячевского ВИЗР Calonge F. D. Notes of the ultrastructure of the microconidium and stroma in Sclerotinia sclerotiorum //Arch.

Microbiol., 1970, 71/2, p. 191–195.

Purdy L. H. A broader concept of the species S. sclerotiorum based on variability //Phythopathol., 1955, 45, 8, p. 421–427.

Steadman J. R. White mold — a serious yeald — limiting disease of bean //Plant dis., 1983, 67, 4, p. 346–350.

Simmonds D. H, Donaldson P. I., Anderson T., Hubbard S., Davidson A., Rioux S., Rajcan I., Cober E. Development of white mould resistant soybean //Proc. of Sclerotinia 2001 — The XI Int. Sclerotinia Workshop, York 8th–12th July 2001, p. 62–63.

Willets H. J., Wong A. L. Ontogenetic diversity of sclerotia of Sclerotinia sclerotiorum and related species //Trans. Br.

mycol. Soc., 1971, 57, 3, p. 515–524.

Willets H. J., Wong J. A. L. The biology of Sclerotinia sclerotiorum, S. trifoliorum and S. minor with emphasis on specific nomenclature //The Botanical review, 1980, 46, 2, 165 p.

GROWTH AND DEVELOPED IN PURE CULTURE SCLEROTINIA

SCLEROTIORUM STRAIN ISOLATED FROM HEMP

The optimum nutrient medium as a soy-glucose agar have been selected for cultivation of Sclerotinia sclerotiorum strain. On this medium a large number of microconidia and the secondary mycelium were formed.

Key words: Sclerotinia sclerotiorum, soy-glucose agar medium, microconidia.

Доклады участников конференции Агаева М. А. Распространенность и вредоносность серой гнили актинидии китайской и меры борьбы с ней.

РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ И ВРЕДОНОСНОСТЬ

СЕРОЙ ГНИЛИ АКТИНИДИИ КИТАЙСКОЙ

И МЕРЫ БОРЬБЫ С НЕЙ

Описаны особенности развития и распространения серой гнили актинидии китайской, оценена ее вредоносность. На основе стационарных наблюдений и маршрутных обследований в различ ных экологических условиях установлено, что распространенность серой гнили актинидии, вы зываемой грибом Botrytis cinerea, в 2009 г. в Астаринском районе Азербайджана была довольно высока, поскольку в отмеченном году имелись оптимальные условия для развития гриба по по казателям температуры и влажности. Количество дождливых дней было больше и относитель ная влажность воздуха выше по сравнению с другими годами. Также установлено интенсивное развитие гриба на плодах в условиях хранения, что приводит к их массовому гниению. Этому, по-видимому, способствует содержание в плодах таких веществ как глюкоза, витамины и др., а также способность гриба хорошо развиваться при сравнительно низких температурах.

Ключевые слова: актинидия, серая гниль, вредоносность, Botrytis cinerea, распространение болезни.

Каспийское побережье Азербайджана — уни- года. Определение возбудителя болезни, а также кальное место, отличающееся мягким влажным вредоносности и интенсивности развития болез субтропическим климатом. Природно-климати- ни проводилось по общепринятым методикам ческие условия этого региона позволяют возде- (Ченкин, 1998;

Хохряков и др., 2003).

лывать такие субтропические культуры как ин жир, фейхоа, хурма, актинидия, кинкан. Среди щим литературным данным (Кутубидзе, Сардже перечисленных актинидия китайская (Actinidia веладзе, 1988) актинидия не повреждается вре chinensis) — самая распространенная культура на дителями и болезнями. По результатам наших Каспийском побережье, в частности в Ленкоран- маршрутных обследований показано, что наса Это растение, требующее для успешного вы- в частности в Ленкорань-Астаринской зоне, в те ращивания мягкого субтропического климата, чение 5 лет вегетации не поражались болезнями, введено в культуру в Ленкорань-Астаринской зоне но в последние годы (2008–2012 гг.) были зафик сравнительно недавно — в конце XX века. Особен- сированы поражения такими широко распростра но интенсивно новые закладки плантаций киви ненными и вредоносными болезнями как фито велись с середины 80-х годов. Актинидия хорошо фторозная корневая гниль, белая и серая гниль растет и плодоносит на достаточно освещенных, плодов (Агаева, 2012).

слабокислых и кислых почвах с рН 4–6 и хорошим Наибольшую опасность для культуры акти дренажом;

она влаголюбива, но не выносит застоя нидий в регионе представляет серая гниль, воз воды в зоне корней и отрицательно реагирует на будителем которой является гриб Botrytis cinerea внесение извести и хлористого калия. Растения Pers. Он относится к группе несовершенных гри нормально переносят и высокую, и низкую темпе- бов — Deuteromucetes, к порядку Hyphomycetales ратуру, но страдают от поздних заморозков. (Moniliales), семейству Mucedinaceae. Это факуль Проведенными исследованиями установлено, тативный паразит, который способен заражать что на субтропических растениях вредоносны не- только ослабленные растения. Заболевание име сколько десятков грибных заболеваний. Часть из ет эпифитотийный характер распространения них непосредственно снижает урожайность расте- и в годы, благоприятствующие его развитию, по ний, вызывая осыпание или гниение плодов, дру- ражает цветки, листья, молодые побеги, плоды.

гие, заражая вегетативные органы, вызывают не- Пораженные органы буреют, покрываясь поро крозы и, в конечном счете, приводят к усыханию шащим налетом серого цвета. Зараженные серой растений. Целью наших исследований являлось гнилью цветки полностью засыхают.

установление распространенности и вредоносно- Проведенными исследованиями установлено, сти серой гнили актинидии китайской. что высокая распространенность болезни отмече Методика исследований. Изучение возбуди- на в Астаринском районе в 2009 году и составля теля серой гнили актинидии китайской проводи- ла 46,4%. В 2010 году она составляла 44,5%, в лось нами в частных и фермерских хозяйствах году — 36,5%, а в 2012 году — 38,6%. Такая же Ленкорань-Астаринской зоны, начиная с 2008 картина наблюдалась и в Ленкоранском районе — высокий процент распространения болезни отме- Плоды хранили в стандартных деревянных Интенсивность развития болезни и формы ее ре 5–10°C и относительной влажности воздуха 85– проявления зависят от гидротермических усло- 90%. Необходимо фиксировать состояние плодов вий. По И. Селянинову оптимальным гидротер- при хранении. Оптимальное время для проверки мическим коэффициентом для цитрусовых куль- состояния плодов — после 7–8 недель холодного тур является 2,5. Величина коэффициента выше хранения, к этому времени почти все первичные или ниже этого показателя считается неблагопри- инфекционные болезни будут иметь видимые ятной для развития растений. Показатель выше симптомы. Возможна также ранняя проверка со 2,5 считается неблагоприятным для развития стояния плодов после 6 недель хранения. Это по растений, но вполне подходит для грибов. Более зволяет идентифицировать все главные болезни, низкий гидротермический коэффициент небла- но выявляет приблизительно 20% инфекционных гоприятен и для растения, и для гриба. В 2009 г. болезней от всего уровня заражения. Через каж в Ленкорань-Астаринской зоне отмечался гидро- дые 10 дней подсчитывали число сохранившихся термический режим 2,2, который для развития плодов (табл.), их общую массу. Подгнившие пло субтропических культур оказался крайне неблаго- ды удаляли во избежание порчи других плодов.

приятным, что вызвало эпифитотию заболевания. Гниль начинает развиваться в холодильнике Botrytis cinerea может служить причиной по- при температуре 0°C у основания плода, там, где ражения плодов при хранении. Учитывая, что се- ранее крепилась цветоножка, затем поражение рая гниль плодов киви сильно проявляется при распространяется на весь плод. Вторичное зара хранении, мы проводили исследования после жение происходит тогда, когда гриб распростра сбора плодов. В результате было установлено, что няется с одного гнилого плода на смежный. Под после сбора необходимо, в первую очередь, про- кожицей пораженный плод прозрачный и пропи водить обработку плодов (сортировка, аттеста- танный водой. Заканчивается поражение полным ция и упаковка). Это позволяет снизить передачу разложением тканей плода.

спор с поверхности одного плода на повреждения Таким образом, показано, что серая гниль ак смежного плода, полученные при сборе. Уменьше- тинидии является не только широко распростра ние перемещения плодов также уменьшает пере- ненным заболеванием, но и обладает высокой сте дачу спор от плода к плоду. Также, в течение 2-х пенью вредоносности, которая зависит от многих дней перед упаковкой и закладкой на холодное причин, особенно от агроклиматических условий.

хранение необходимо проводить проветривание Развитию болезни способствует слабая аэрация плодов при температуре окружающей среды, что или доступ солнечного света.

значительно уменьшает гниль плодов. Быстрое же охлаждение плодов может увеличивать пора жение плодов гнилью при хранении.

Таблица. Распространение серой гнили при хранении плодов киви пораженных серой гнилью в разные годы Литература Агаева М. А. Грибные болезни актинидии китайской. Материалы международной заочной научно-практиче ской конференции. Новосибирск, Изд. «ЭКОР — книга», 2012, 148 с.

Кутубидзе В. В, Сарджвеладзе Г. П. Актинидия — перспективная культура для советских субтропиков // Субтропические культуры, 1988, 5, с. 1–3.

Хохряков М. К., Добразракова Т. Л., Степанов К. М., Летова М. Ф. Определитель болезней растений. М., Краснодар, 2003, 593 с.

Ченкин А. Ф. Методика организации учета вредных организмов. М., 1993, 65 с.

Азовская Н. О.

Биологический и инфекционный цикл развития гриба Sphaeropsis sapinea в Белоруссии.

PREVALENCE AND HARMFULNESS OF GREY ROT OF ACTINIDIA CHINENSIS AND

CONTROL OF THE DISEASE

Development and prevalence of grey rot of Actinidia chinensis were shown. This disease was one of the more harmful. The observations in the experimental plots and monitoring of the disease in different ecological areas it was established that spreading of Botrytis cinerea was highly in the Astara region of Azerbaijan in 2009. In that year a number of rainy days and relative air humidity were higher than in other years. The development of fungus on fruits during the storage was also evaluated.

Key words: kiwifruit, grey rot, harmfulness, Botrytis cinerea, disease prevalence.

БИОЛОГИЧЕСКИЙ И ИНФЕКЦИОННЫЙ ЦИКЛ РАЗВИТИЯ

ГРИБА SPHAEROPSIS SAPINEA В БЕЛОРУССИИ

Белорусский государственный технологический университет (bstu.unibel.by), В Белоруссии, как в других странах, на сосне наблюдается диплодиоз, вызываемый грибом Sphaeropsis sapinea. Болезнь причиняет особый ущерб молодым растениям, нередко приводя к их гибели. В связи с отсутствием информации по биологическим особенностям этого забо левания в странах Европы, нами были проведены собственные фенологические наблюдения в течение нескольких лет для установления сроков появления первых симптомов болезни и раз вития гриба на сосне обыкновенной в условиях Белоруссии, что необходимо для обоснования лесозащитных мероприятий.

Ключевые слова: цикл развития, диплодиоз, Sphaeropsis sapinea, пикниды, конидии, сосна обыкно Начиная с 2009 г. в несомкнувшихся сосновых и несомкнувшихся насаждениях. Целью нашей насаждениях и молодняках наблюдается эпифи- работы являлось изучение фенологии и цикла тотия нового для Белоруссии заболевания под развития гриба S. sapinea, чтобы в последующем названием диплодиоз (Ярмолович и др., 2010). на этой основе обосновать сроки проведения ле Это, как правило, болезнь молодых (до 15–20 лет) созащитных мероприятий.

растений сосны, приводящая к усыханию побе- Фенологические наблюдения патогенного гов текущего года и торможению ростовых про- гриба проводились в условиях Белоруссии на цессов, а при сильном поражении — к многовер- протяжении 2009–2012 гг. на сосне обыкновенной шинности или гибели растения. В других странах в возрасте 5–10 лет.

заболевание поражает более 40 видов хвойных В результате проведенных наблюдений уста деревьев, и может вызывать гибель взрослых на- новлено, что жизненный цикл гриба S. sapinea саждений, образование язв на стволе и ветвях, представлен только в анаморфной (вегетативной, усыхание вершины, увядание почек, массовую бесполой) стадии. На рисунке представлен цикл гибель сеянцев и саженцев в питомниках и синеву развития гриба в течение года. Заражение мо древесины (Peterson, 1981). Также патоген может лодых формирующихся побегов спорами гриба встречаться на шишках различных видов сосен, происходит весной (обычно во второй половине приводя к гибели семян (Vagniluca, 1995). Дипло- апреля), при температуре 10–15°C и влажности диоз в Белоруссии является основным фактором воздуха 40–100%. Инфекция переносится капля усыхания побегов в молодых насаждениях (более ми воды, ветром и насекомыми. Спора гриба дает 50% случаев). Заболевание вызывается несовер- начало инфекционной гифе, которая внедряется шенным грибом Sphaeropsis sapinea (Fr.) Dyko et B. в молодые неодревесневевшие побеги. Заражение Sutton (= Diplodia pinea [Desm.] J. Kickx F.) и чаще происходит через устьица побегов или через раз встречается на растениях в лесных питомниках личные механические повреждения.

Инкубационный период обычно длится две– жизнеспособные, но быстро теряют упругость по три недели. Грибница распространяется внутри всей длине, усыхают, часто свисают вниз.

коры, далее проникает в камбий и древесину, вы- В конце июля–августе большинство пора зывая их отмирание. В качестве защитной реак- женных побегов засыхает. Пикниды становят ции растения на начальных этапах развития бо- ся черными, четко заметными на поверхности лезни наблюдается выделение живицы, которая, коры и хвое. Начинается массовая споруляция со временем, забивает проводящие элементы де- при температуре 17–21°C и влажности 70–80%;

рева, что приводит к прекращению восходящего конидии, в большинстве созревшие, выходят на тока воды с минеральными элементами питания ружу из пикнид, продолговато-цилиндрические, и нисходящего тока органических веществ. иногда почти булавовидные, округленные ввер Рисунок. Цикл развития гриба S. sapinea В начале июня (через месяц после начала ро- ху, несептированные, чаще с одной перегородкой ста побегов) побеги начинают увядать и засы- (очень редко с двумя), толстостенные, вначале хать, они светлеют, проводящие ткани перестают желтоватые, зрелые — темно-коричневые. Разме выполнять свои функции. Если побег растет из ры пикнид колеблются в пределах 110–828 мкм почки, которая находится ниже зараженного по- в длину и 28–371 мкм в ширину;

количество спор бега, то он оказывается уже зараженным. В начале в одной пикниде варьирует от 400 до 2600, раз июля (через 2 месяца после начала роста побегов) меры спор лежат в пределах 19–48 мкм в длину в местах внедрения патогена на побегах обнару- и 4–20 мкм в ширину.

живаются спороношения в виде полупогружен- На протяжении сентября–ноября пикниды ных в ткани растения подушечек;

пикниды гриба продолжают появляться по всей длине побегов заметны невооруженным глазом, округлые одно- и хвое, причем, по большей части, вверх от места камерные толстостенные, темно-коричневые. На заражения. Споры в основной массе созревшие, побегах формируются многочисленные язвочки, но в появляющихся пикнидах есть еще и зрею часто с капельками смолы. В середине лета спо- щие, бесцветные. Основная часть инфекционно ры в основном еще незрелые. В это время побеги го материала зимует на пораженных побегах. На Алексеева К. Л. Виды рода Cladobotryum, вызывающие болезни культивируемых съедобных грибов.

протяжении осени споры на побегах продолжают Для выявления истинного масштаба поражения созревать. В это время конидии разносятся ветром растений диплодиозом и для назначения лесоза Гриб способен также поражать формирующи- и лесозащиты рекомендуется проводить лесопа еся шишки сосны, образуя на них типичные ко- тологический надзор в первой половине сентября, Цикл развития гриба S. sapinea включает толь- лезни: усыхание побегов текущего года прироста, ко конидиальное спороношение (пикниды). Ко- окраска их в соломенный цвет и потеря упругости, нидии способны формироваться на пораженных а также на наличие темных мелких пикнид на от побегах в течение июля–ноября, во многих случа- мерших побегах и хвое.

ях споры дозревают в пикнидах до конца осени.

Литература Ярмолович В. А., Азовская Д. Б., Беломесяцева Н. О. Диплодиоз — опасное заболевание молодых деревьев сосны.

Лесное и охотничье хозяйство, 2010, 80, 3, c. 2831.

Peterson G. W. Diplodia Blight of Pines / G. W. Peterson // Forest Insect and Disease Leaflet 161. — Lincoln: U. S.

Department of Agriculture, Forest Service, 1981, p. 6.

Vagniluca S. Cankers and shoot blight of Pinus pinea in Italy / S. Vagniluca, V. Goggioli, P. Carpetti // Proceedings of a Joint Meeting of the Working Parties Canker and Shoot Blight of Conifers (Italy, Jule 6-11, 1994). — Fierenze:

Tipografia Bertelli, 1995, р. 284–286.

BIOLOGICAL AND INFECTIOUS CYCLE OF SPHAEROPSIS SAPINEA IN BELARUS

Belarusian State Technological University (bstu.unibel.by), Minsk, Belarus, azovskaya_natasha@tut.by In Belarus along with other countries Diplodia tip blight, caused by the fungus Sphaeropsis sapinea, has been found. The disease causes particular damage to young plants, resulting quite often in their death. Due to lack of information about biological features of the disease in Europe we carried out phenological observations during several years to determine the term of appearance of the first disease symptoms and fungus development on Pinus sylvestris L. in Belarus that was necessary for substantiation of protective measures.



Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 21 |
 




Похожие материалы:

«Министерство сельского хозяйства Российской Федерации Российская академия сельскохозяйственных наук Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт электрификации сельского хозяйства (ГНУ ВИЭСХ) Московский государственный агроинженерный университет им. В.П. Горячкина (МГАУ) Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт механизации сельского хозяйства (ГНУ ВИМ) ЭНЕРГООБЕСПЕЧЕНИЕ И ЭНЕРГОСБЕРЕЖЕНИЕ В СЕЛЬСКОМ ХОЗЯЙСТВЕ ...»

«Российская академия сельскохозяйственных наук Министерство сельского хозяйства Российской Федерации Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт электрификации сельского хозяйства (ГНУ ВИЭСХ) Московский государственный агроинженерный университет им. В.П. Горячкина (МГАУ) ФГНУ Российский научно-исследовательский институт информации и технико-экономических исследований по инженерно-техническому обеспечению АПК (ФГНУ РОСИНФОРМАГРОТЕХ) ЭНЕРГООБЕСПЕЧЕНИЕ И ...»

«Российская академия сельскохозяйственных наук Министерство сельского хозяйства Российской Федерации Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт электрификации сельского хозяйства (ГНУ ВИЭСХ) Московский государственный агроинженерный университет им. В.П. Горячкина (МГАУ) ФГНУ Российский научно-исследовательский институт информации и технико-экономических исследований по инженерно-техническому обеспечению АПК (ФГНУ РОСИНФОРМАГРОТЕХ) ЭНЕРГООБЕСПЕЧЕНИЕ И ...»

«Российская академия сельскохозяйственных наук Министерство сельского хозяйства Российской Федерации Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт электрификации сельского хозяйства (ГНУ ВИЭСХ) Московский государственный агроинженерный университет им. В.П. Горячкина (МГАУ) ФГНУ Российский научно-исследовательский институт информации и технико-экономических исследований по инженерно-техническому обеспечению АПК (ФГНУ РОСИНФОРМАГРОТЕХ) ЭНЕРГООБЕСПЕЧЕНИЕ И ...»

«Российская академия сельскохозяйственных наук Министерство сельского хозяйства Российской Федерации Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт электрификации сельского хозяйства (ГНУ ВИЭСХ) Московский государственный агроинженерный университет им. В.П. Горячкина (МГАУ) ФГНУ Российский научно-исследовательский институт информации и технико-экономических исследований по инженерно-техническому обеспечению АПК (ФГНУ РОСИНФОРМАГРОТЕХ) Открытое акционерное ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ АГРОХИМИИ им. Д. Н. ПРЯНИШНИКОВА ПОЧВЕННЫЙ ИНСТИТУТ им. В. В. ДОКУЧАЕВА УТВЕРЖДАЮ УТВЕРЖДАЮ Министр сельского хозяйства Президент Российской академии Российской Федерации сельскохозяйственных наук _А. В. Гордеев _Г. А. Романенко 24 сентября 2003 г. 17 сентября 2003 г. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ПРОВЕДЕНИЮ КОМПЛЕКСНОГО МОНИТОРИНГА ПЛОДОРОДИЯ ПОЧВ ...»

«МЕЛИОРАЦИЯ: ЭТАПЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ Материалы международной научно- производственной конференции Москва 2006 РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт гидротехники и мелиорации имени А.Н.Костякова МЕЛИОРАЦИЯ: ЭТАПЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ Материалы международной научно-производственной конференции, посвященной 40-летию начала осуществления широкомасштабной программы мелиорации Москва 2006 УДК 631.6 М 54 ...»

«ПЧЕЛОВОДСТВО А.Г МЕГЕДЬ В.П. ПОЛИЩУК Допущено Государственным агропромышленным комитетом Украинской ССР в качестве учебника для средних специальных учебных заведений по специальностям Пчеловодство и Зоотехния Киев Выща школа 1990 ББК 46.91я723 М41 УДК 638.1(075.3) Рецензенты: преподаватель М. И. Совкунец (Борзнянский совхоз-техникум Черни говской области), И. Ф. Доля (заведующий пчелофермой Республиканского учеб но-производственного комбината по пчеловодству) Переведено с издания: Мегедь О. Г., ...»

«Санкт-Петербургский государственный университет. Институт наук о Земле ГНУ Центральный музей почвоведения им. В.В. Докучаева ГНУ Почвенный институт им. В.В. Докучаева Фонд сохранения и развития научного наследия В.В. Докучаева Общество почвоведов им. В.В. Докучаева МАТЕРИАЛЫ Международной научной конференции XVII Докучаевские молодежные чтения посвященной 110-летию Центрального музея почвоведения им. В.В. Докучаева НОВЫЕ ВЕХИ В РАЗВИТИИ ПОЧВОВЕДЕНИЯ: СОВРЕМЕННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ КАК СРЕДСТВА ПОЗНАНИЯ ...»

«Санкт-Петербургский государственный университет ГНУ Центральный музей почвоведения им. В.В. Докучаева Россельхозакадемии ГНУ Почвенный институт им. В.В. Докучаева Россельхозакадемии Фонд сохранения и развития научного наследия В.В. Докучаева Общество почвоведов им. В.В. Докучаева МАТЕРИАЛЫ Международной научной конференции XVI Докучаевские молодежные чтения посвященной 130-летию со дня выхода в свет книги Русский чернозем В.В. Докучаева ЗАКОНЫ ПОЧВОВЕДЕНИЯ: НОВЫЕ ВЫЗОВЫ 4– 6 марта 2013 года ...»

«Санкт-Петербургский государственный университет ГНУ Центральный музей почвоведения им. В.В. Докучаева Россельхозакадемии ГНУ Почвенный институт им. В.В. Докучаева Россельхозакадемии Фонд сохранения и развития научного наследия В.В. Докучаева Общество почвоведов им. В.В. Докучаева МАТЕРИАЛЫ Международной научной конференции XV Докучаевские молодежные чтения посвященной 150-летию со дня рождения Р.В. Ризположенского ПОЧВА КАК ПРИРОДНАЯ БИОГЕОМЕМБРАНА 1– 3 марта 2012 года Санкт-Петербург ...»

«Санкт-Петербургский государственный университет ГНУ Центральный музей почвоведения им. В.В. Докучаева Россельхозакадемии ГНУ Почвенный институт им. В.В.Докучаева Россельхозакадемии Фонд сохранения и развития научного наследия В.В. Докучаева Общество почвоведов им. В.В. Докучаева МАТЕРИАЛЫ Всероссийской научной конференции XIV Докучаевские молодежные чтения посвященной 165-летию со дня рождения В.В.Докучаева ПОЧВЫ В УСЛОВИЯХ ПРИРОДНЫХ И АНТРОПОГЕННЫХ СТРЕССОВ 1– 4 марта 2011 года Санкт-Петербург ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ДЕПАРТАМЕНТ НАУЧНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ ПОЛИТИКИ И ОБРАЗОВАНИЯ САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ СЕВЕРО-ЗАПАДНАЯ ВЕТЕРИНАРНАЯ АССОЦИАЦИЯ МАТЕРИАЛЫ МЕЖДУНАРОДНОЙ НАУЧНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ ЗНАНИЯ МОЛОДЫХ ДЛЯ РАЗВИТИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И АПК СТРАНЫ Санкт-Петербург 2012 1 УДК: 619 (063) Материалы международной научной конференции студентов, аспи рантов и молодых ученых Знания ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УЧРЕЖДЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ ГРОДНЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ МАТЕРИАЛЫ ХІІ МЕЖДУНАРОДНОЙ СТУДЕНЧЕСКОЙ НАУЧНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ (Гродно, 18-20 мая 2011 года) В ТРЕХ ЧАСТЯХ ЧАСТЬ 3 АГРОНОМИЯ ЗАЩИТА РАСТЕНИЙ ЗООТЕХНИЯ ВЕТЕРИНАРИЯ ТЕХНОЛОГИЯ ХРАНЕНИЯ И ПЕРЕРАБОТКИ ОБЩЕСТВЕННЫЕ НАУКИ К 60-летию вуза Гродно УО ГГАУ УДК 63 (06) ББК М Материалы ХІІ Международной студенческой научной конференции. – Гродно, 2011. – ...»

«Казанский (Приволжский) федеральный университет Общество почвоведов им. В.В. Докучаева Институт проблем экологии и недропользования АН РТ НАСЛЕДИЕ И.В. ТЮРИНА В СОВРЕМЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ В ПОЧВОВЕДЕНИИ Материалы международной научной конференции Казань, 15-17 октября 2013 г. И.В.Тюрин (1892-1962) Казань 2013 УДК 631.4 ББК 40.3 Печатается по решению Ученого совета Института фундаментальной медицины и биологии ФГБОУ ВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет Наследие И.В. Тюрина в ...»

«ISSN 1561-1124 МАТЕРИАЛЫ ПО ИЗУЧЕНИЮ РУССКИХ ПОЧВ ВЫПУСК 7 (34) Издательство Санкт-Петербургского университета 2012 САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ КАФЕДРА ПОЧВОВЕДЕНИЯ И ЭКОЛОГИИ ПОЧВ ЦЕНТРАЛЬНЫЙ МУЗЕЙ ПОЧВОВЕДЕНИЯ ИМ. В.В.ДОКУЧАЕВА МАТЕРИАЛЫ ПО ИЗУЧЕНИЮ РУССКИХ ПОЧВ ВЫПУСК 7 (34) Издание основано в 1885 г. А.В. Советовым и В.В. Докучаевым Издательство С.-Петербургского университета 2012 УДК 631.4 ББК 40.3 М34 Редакционная коллегия: Б.Ф. Апарин (председатель), Е.В. Абакумов, ...»

«ISSN 1561-1124 МАТЕРИАЛЫ ПО ИЗУЧЕНИЮ РУССКИХ ПОЧВ ВЫПУСК 6 (33) Издательство Санкт-Петербургского университета 2009 САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ КАФЕДРА ПОЧВОВЕДЕНИЯ И ЭКОЛОГИИ ПОЧВ ЦЕНТРАЛЬНЫЙ МУЗЕЙ ПОЧВОВЕДЕНИЯ ИМ. В.В.ДОКУЧАЕВА МАТЕРИАЛЫ ПО ИЗУЧЕНИЮ РУССКИХ ПОЧВ ВЫПУСК 6 (33) Издание основано в 1885 г. А.В. Советовым и В.В. Докучаевым Издательство С.-Петербургского университета 2009 УДК 631.4 + 577.34 ББК 40.3 М34 Редакционная коллегия: И.А. Горлинский (председатель), Б.Ф. ...»

«X ДАЛЬНЕВОСТОЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ ПО ЗАПОВЕДНОМУ ДЕЛУ МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ 25-27 сентября 2013 г. г. Благовещенск АМУРСКИЙ ФИЛИАЛ БОТАНИЧЕСКОГО САДА-ИНСТИТУТА ДВО РАН АМУРСКИЙ ФИЛИАЛ WWF РОССИИ БЛАГОВЕЩЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПЕДАГОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ РОССИЙСКИЙ ФОНД ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ АМУРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ СОЦИАЛЬНО-ЭКОЛОГИЧЕСКОГО СОЮЗА АМУРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ РУССКОГО БОТАНИЧЕСКОГО ОБЩЕСТВА СОВЕТ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ АФ БСИ ДВО РАН X ДАЛЬНЕВОСТОЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ ПО ЗАПОВЕДНОМУ ДЕЛУ 25-27 сентября ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГОУ ВПО УЛЬЯНОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ – ФИЛИАЛ ФГОУ ВПО УЛЬЯНОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ МАТЕРИАЛЫ IX МЕЖДУНАРОДНОЙ СТУДЕНЧЕСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ КОНФЕРЕНЦИИ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ 31 марта 2011 Димитровград 2011 г. УДК 631 Редакционная коллегия: Главный редактор Х.Х. Губейдуллин Научный редактор Т.А. Мащенко Редакционная коллегия И.И. Шигапов А.М. Кадырова ...»






 
© 2013 www.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.